ANALISIS PROTEIN PADA MEDIUM TERKONDISI SEL PUNCA MESENKIMAL
DOI:
https://doi.org/10.33088/jmk.v14i2.720Keywords:
Sel punca mesenkimal; protein; medium terkondisi.Abstract
Sel punca mesenkimal / mesenchymal stem cells (MSC) merupakan sel yang paling banyak membentuk organ stroma sumsum tulang belakang. MSC memiliki kemampuan memperbarui diri sampai jumlah yang cukup untuk menyembuhkan luka. Media tempat tumbuh MSC yang belum berdiferensiasi disebut media terkondisi sel punca mesenkimal atau mesenchymal stem cells-conditioned medium (MSC-CM) dan mempunyai efek seperti MSC. Pada penelitian ini dilakukan analisa kandungan protein yang terdapat dalam MSC-CM yang diisolasi dari jaringan adiposa. Analisis protein menggunakan uji Ninhidrin dan Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis (SDS-PAGE). Hasil Uji Ninhidrin menunjukkan terjadinya perubahan warna dari merah muda ke ungu yang berarti hasil positif terdapat asam amino. Hasil uji dengan metoda SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulphate Polyacrylamide Gel Electrophoresis), profil protein MSC-CM diamati berdasarkan berat molekulnya. Protein terdeteksi pada ukuran 38 kDa – 98 kDa yang terdiri dari VEGF pada 45 kDa, EGF containing fibulinlike pada 55 kDa, ECM protein 1 pada 61 kDa dan TGF? pada 75 kDa. Berdasarkan uji identifikasi protein pada MSC-CM didapatkan hasil yang menunjukan positif adanya kandungan protein yang diprediksi sebagai faktor pertumbuhan yang disekresikan oleh MSC.
Downloads
References
ATCC (2014) Animal Cell Culture Guide. Manassas.
Azarpira, N. (2015) ‘The Role of Mesenchymal Stem Cells in Diabetes Mellitus’, International Journal of Stem cell Research & Therapy, 2(2), pp. 1–5. doi: 10.23937/2469-570x/1410010.
Fu, X. et al. (2007) ‘Adipose tissue extract enhances skin wound healing’, Wound Repair and Regeneration, 15(4), pp. 540–548. doi: 10.1111/j.1524-475X.2007.00262.x.
Halim, D. et al. (2010) Stem Cell: Dasar Teori & Aplikasi Klinis. Erlangga.
Invitrogen (2009) ‘DMEM Dulbecco’s Modified Eagle Media’.
Laqif, A. (2015) Kajian Terapi Media Terkondisi Sel Punca Mesensimal (MT-SPM) Selaput Amnion pada Kasus Kegagalan Ovarium Prematur (Penelitian pada Hewan Coba Tikus Sprague-Dawley). Universitas Gadjah Mada.
Lestari, N. K. L., Suardana, I. W. and Sukrama, I. D. M. (2019) ‘Karakteristik Fisikokimia dan Uji Aktivitas Antimikroba Bakteriosin dari Isolat Bakteri Asam Laktat 15B hasil Isolasi Kolon Sapi Bali’, Buletin Veteriner Udayana, (21), p. 65. doi: 10.24843/bulvet.2019.v11.i01.p11.
Ma’at, S. (2011) Teknik Dasar Kultur Sel. Yogyakarta: Airlangga University Press.
Mather, J. P. and Roberts, P. E. (1998) Introduction to Cell and Tissue Culture Theory and Technique. Edited by J. P. Mather and P. E. Roberts. New York: Plenum Press.
Osugi, M. et al. (2012) ‘Conditioned media from mesenchymal stem cells enhanced bone regeneration in rat calvarial bone defects’, Tissue Engineering - Part A, 18(13–14), pp. 1479–1489. doi: 10.1089/ten.tea.2011.0325.
Rifati, L. et al. (2012) Laporan Penelitian?: Induksi In-Vitro Sel Punca Mesenkim dari Tali Pusat Manusia Menjadi Sel Punca Limbal. Jakarta.
Rizal, R. et al. (2019) ‘Effect of Serial Passage on Growth Kinetics, Biological Properties, and Differentiation Into Adipocytes of Human Whartonâ€TMS Jelly-Derived Mesenchymal Stem Cells’, Majalah Kedokteran Bandung, 51(3), pp. 127–133. doi: 10.15395/mkb.v51n3.1767.
Simper, D. et al. (2010) ‘Comparative proteomics profiling reveals role of smooth muscle progenitors in extracellular matrix production’, Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology, 30(7), pp. 1325–1332. doi: 10.1161/ATVBAHA.110.204651.
Stefanini, M. O. et al. (2008) ‘A compartment model of VEGF distribution in blood, healthy and diseased tissues’, BMC Systems Biology, 2, pp. 1–25. doi: 10.1186/1752-0509-2-77.
Tiwari, A. (2017) Practical Biochemistry?: A Student Companion. Guwahati: Lambert Academy Publishing.
Toda, A. et al. (2007) ‘The potential of amniotic membrane/amnion-derived cells for regeneration of various tissues’, Journal of Pharmacological Sciences, 105(3), pp. 215–228. doi: 10.1254/jphs.CR0070034.
Walter, M. N. M. et al. (2010) ‘Mesenchymal stem cell-conditioned medium accelerates skin wound healing: An in vitro study of fibroblast and keratinocyte scratch assays’, Experimental Cell Research, 316(7), pp. 1271–1281. doi: 10.1016/j.yexcr.2010.02.026.
Widowati, W. et al. (2015) ‘Conditioned medium from normoxia (WJMSCs-norCM) and hypoxia-treated WJMSCs (WJMSCs-hypoCM) in inhibiting cancer cell proliferation’, Biomarkers and Genomic Medicine, 7(1), pp. 8–17. doi: 10.1016/j.bgm.2014.08.008.
Wolbank, S. et al. (2010) ‘Alternative sources of adult stem cells: Human amniotic membrane’, Advances in Biochemical Engineering/Biotechnology, 123, pp. 1–27. doi: 10.1007/10_2010_71.